一、工作目的
通过本方案的编制与实施，切实加强奶牛布鲁氏菌病和结核病（以下简称“两病”）控制与净化工作，检查和验证“两病”防治规划的实施情况，并对其实施效果做出科学评价。掌握北京市“两病”疫情动态、流行规律，及时发现和处理疫情，为疫情预测预报及制定防治对策提供科学依据，最大程度地降低因“两病”所造成的经济损失。
二、职责分工
（一）市兽医实验诊断所
1、制定、修改、完善全市“两病”控制与净化监测计划、方案。
2、负责奶牛布病样品采集工作的督察，指导各区县完成布病监测样品采集工作。
3、负责全市布病样品的检测以及结核病的复检定性工作。
4、负责全市“两病”监测数据、信息的收集、汇总、分析、评估以及疫情预警预报，提供相关监测技术问题的咨询服务工作。
（二）区县动物疫病预防控制中心
1、根据监测计划的要求，组织实施布病监测点样品的采集、送检。
2、组织实施辖区内牛结核病的现场检测工作。
3、对奶牛养殖场（户）的相关资料进行收集、汇总和分析，并及时上报。
三、工作措施
（一）布病
1、监测范围
奶牛布病监测面要达到100％，覆盖全市14个区县的所有奶牛养殖场（户），包括奶牛规模化种场、规模化商品场、养殖小区及养殖户等。
2监测对象
所有6月龄以上的布病非免疫奶牛；布病S2或S19菌苗免疫接种6个月后的奶牛。
3、监测方式
开展血清学和病原学监测。
4、监测频率和时间
每半年监测1次，全年共进行2次。2010年5月底前和11月底前分别完成全市14个区县应检奶牛布病的血清学监测工作。
根据临床状况，适时采集样品进行病原学监测。
5、检测方法及程序
（1）血清学检测
1）方法
初筛试验：布病荧光偏振试验（FPA）。
复核试验：动物布病试管凝集试验（SAT）（GB/T 18646-2002）
动物布病酶联免疫吸附试验（c-ELISA）
2）程序
所有血清样品先用布病荧光偏振试验（FPA）进行初筛。
初筛阳性和可疑的布病非免疫奶牛用试管凝集试验（SAT）进行复检确诊，确诊试验可疑的，隔离21天再进行检测。
初筛阳性和可疑的布病免疫奶牛用酶联免疫吸附试验（c-ELISA）进行复检确诊，确诊试验阳性的，须隔离21天再进行检测。
布病阳性牛群须跟踪检测：检出的布病阳性牛群须在检测后30天重检，如仍有阳性，须再经45天后重检。
（2）病原学检测
对临床有流产症状的奶牛可在血清学检测的同时，采集流产胎儿、胎衣、阴道分泌物等进行病原学检测。检测方法参照《布鲁氏菌病防治技术规范》和《奶牛布鲁氏菌病PCR诊断技术》（NY/T 1467-2007）执行。
6、结果判定
（1）初筛试验出现阳性反应，并有流行病学史和临床症状或分离出布鲁氏菌、PCR试验阳性，判为病畜。
（2）血清学正式试验中试管凝集试验阳性或布病竞争ELISA试验阳性，判为阳性畜。
7、采样及送检时间
样品采集由区县动物疫病预防控制中心负责完成，市诊断所派技术人员负责采样工作的督查。样品经统一编号后，在规定的时间内，按样品运输要求及时送市兽医实验诊断所。
（1）上半年摸底监测
备注：春防期间已开展布病净化工作的区（县），在自行监测的同时需留样送检（不必再行采血）；2010年3月已进行种畜禽验收布病检测项目的种牛（个体）本次监测可不采样。
（2）下半年全群监测
8、样品采集要求
（1）各类监测样品的采集须严格按照标准要求操作，务必确保监测样品质量合格。
（2）血清样品无溶血，无腐败，不能反复冻融；血清样品量每份不少于0.5毫升，须保存在2mL 96孔深孔板（自备）中，深孔板中的加样顺序须严格按照附表3的顺序加样,并用封板膜封板，务必防止样品溢出，并冷冻送检。
（3）流产胎儿、胎衣、阴道分泌物要求新鲜，无腐败变质，冷藏送检。
9、采样登记表和样品编号要求
（1）采样登记表：采样时认真填写登记表，详细填写相关的记录档案，送检样品时必须附带采样登记表，以确保监测结果的可追溯。
（2）样品编号：采集的样品按规定严格编号（每一区县的所有样品序号从1号开始大排行），做到字号清晰、易辨认。采样登记表、样品编号表、深孔板中编号必须完全一致，深孔板的封板膜上须按顺序标明样品序号，防止编号错乱。
10、监测结果处理
市兽医实验诊断所对全市布病监测结果分析、汇总和报告，并及时将监测结果反馈各区县动物疫病预防控制中心备案。对于阳性牛，各区县要按照有关规定及时进行扑杀和无害化处理。
11、其他要求
（1）及时报送不符合检验条件牛的基础信息。各区县在采样和登记信息的同时，要将6月龄以下以及免疫布病S2或S19菌苗6个月以内的奶牛进行调查并填表登记（见附表4、附表5），随同监测样本及其相关信息一并上报我所。
（2）高度重视“两病”净化工作。今年是我市“两病”五年期净化工作的起始之年，各区县要给予高度重视，成立“两病”净化专项工作组，责任到人，把布病采样和结核病现场检测工作任务切实落实到位，努力做到应检奶牛的100%采样送样以及现场检测。同时，各区县要认真做好采样信息的登记工作，以便我所采样经费补贴的有效落实。
（二）结核病
1、监测范围
奶牛结核病监测面要达到100％，覆盖全市14个区县的所有奶牛养殖场（户），包括奶牛规模化种场、规模化商品场、养殖小区及养殖户等。
2、监测对象
所有20日龄以上的奶牛
3、监测频率和时间
每半年监测1次，全年共进行2次。各区县动物疫病预防控制中心分别于2010年4月份和10月份自主组织完成两次监测工作。
4、检测方法
牛型结核分枝杆菌PPD（提纯蛋白衍生物）皮内变态反应试验（即牛提纯结核菌素皮内变态反应试验）（GB/T 18645-2002）
5、结果判定
牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验阳性的牛，判为结核病牛。
6、监测结果处理
各区县动物疫病预防控制中心对监测结果及相关资料进行收集、汇总和分析，并及时上报。市兽医实验诊断所及时对全市监测结果分析、汇总和报告。对于阳性牛，各区县要按照有关规定及时进行扑杀和无害化处理。
附表1：《北京市奶牛布病监测采样登记表》
附表2：《北京市奶牛布病监测样品编号表》
附表3：《深孔板中血清样品编号顺序表》
附表4：《6月龄内犊牛基本情况调查汇总表》
附表5：《布病免疫接种6个月内奶牛情况调查汇总表》
附件下载：1.北京市奶牛布病监测采样登记表.doc
2.北京市奶牛布病监测样品编号表
3.深孔板中血清样品编号顺序表.doc
4.6月龄内犊牛基本情况调查汇总表.doc
5.布病免疫接种6个月内奶牛情况调查汇总表.doc
